AVALIAÇÃO DO EFEITO DE UMA NOVA CISTATINA DERIVADA DA CANA-DE- AÇÚCAR (CANECPI-5) SOB A VIABILIDADE DE BIOFILME MICROCOSMO: ESTUDO IN VITRO

Abstract

Recentemente, uma nova cistatina derivada da cana-de-açúcar (CaneCPI-5) foi produzida em sistema de expressão heteróloga e demonstrou uma alta capacidade de ligação ao esmalte, protegendo contra a erosão do esmalte in vitro. Em adição, as proteases da matriz são muito importantes para a progressão da cárie em dentina e as cistatinas, incluindo a CaneCPI-5, são inibidores de cisteíno-catepsinas, o que pode ter um efeito adicional na prevenção da cárie em dentina. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de diferentes concentrações da CaneCPI-5 sob a viabilidade de um biofilme microcosmo em dentina. Para a formação do biofilme microcosmo, foi coletada a saliva de 10 indivíduos saudáveis, que escovaram os dentes nas últimas 24h e que não tenham bebido líquidos ou ingerido alimentos nas últimas 2h. A saliva foi diluída (70% saliva e 30% glicerol), e posteriormente misturada à saliva artificial de McBain (1:50) para formação do biofilme cariogênico. Amostras (4 mm x 4 mm) de dentina bovina (n=45) foram preparadas para a formação do biofilme microcosmo por 5 dias, o qual será tratado diariamente (1x60s/dia) com as concentrações de CaneCPI-5 0,025 e 0,05 mg/ml, clorexidina 0,12% (controle positivo), Fluoreto e PBS (controle negativo). A atividade metabólica do biofilme através da adição de 1,5 ml do corante resazurina diluído em PBS na concentração de 0,0016% e incubadas por um período de 2 h na estufa a 37ºC e 5% CO2. Nas concentrações avaliadas, a CaneCPI-5 não foi capaz de reduzir a atividade metabólica do biofilme de microcosmos em relação ao controle negativo, tendo uma performance menor que a do controle positivo.