ATIVIDADE ANTIMICROBIANA E DA REAÇÃO DO TECIDO SUBCUTÂNEO DE RATOS Á IMPLANTAÇÃO DO CIMENTO PORTLAND ASSOCIADO AO AH PLUS EM DIFERENTES PROPORÇÕES

Abstract

O objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana e aresposta do tecido subcutâneo de ratos à implantação do cimento Portland associado ao AH Plus em diferentes proporções (50% de cimento AH Plus + 50% de cimento Portland; 60% de cimento AH Plus + 40 % de cimento Portland; 70% de cimento AH Plus + 30% de cimento Portland; 80% de cimento AH Plus + 20% de cimento Portland; 90% de cimento AH Plus + 10% de cimento Portland; 100% cimento Portland;100% AH Plus). Para a avaliação da ação biológica, foram utilizados 42 ratos (RattusNorvegicus), que foram divididos em 14 animais para cada período experimental. Cada animal recebeu quatro implantes de tubos de polietileno, preenchidos com os materiais recém-espatulados.Após 7, 14 e 30 dias, os animais foram eutanaziados e os espécimes foram preparados para análise microscópica. A análise microscópica foi realizada considerando-se o tecido presente na embocadura do tubo de polietileno, em contato com o material a ser testado.Para se avaliar a sensibilidade bacteriana aos cimentos estudados, foi utilizada a técnica de difusão radial da substância sobre a superfície de placas de Mueller-Hintonagar. As bactérias testadas foram de linhagens de campo e 1 ATCC 29212. As estirpes foram retiradas da bacterioteca e ativadas sobre a superfície de placas de Brucellaagar suplementado com 5% de sangue de carneiro, incubadas a 36oC por 24 horas. A partir dessas placas, 5 colônias foram transferidas para um tubo contendo 5 mL de caldo BHI que foi incubado a 36oC “overnight”. A partir do crescimento, foi preparado em salina estéril o ajuste para a densidade ótica do padrão de turbidez da escala 0,5 de McFarland (1,5 x 108 Unidades Formadoras de Colônias /mL). Placas de Petri de 100 x 10 mm previamente preparadas com Mueller-Hintonagar (Merck®) na espessura de 6 mm foram escavadas em poços com 5 mm de diâmetro por 3 mm de profundidade. Uma vez ajustada a densidade do inóculo, a semeadura foi feita através de zaragatoa de algodão estéril na superfície das placas, tomando-se o cuidado de não semear o interior das escavações. As placas foram colocadas em estufa por 30 minutos para secagem da superfície do meio de cultura antes da colocação dos cimentos. Os seguintes cimentos foram utilizados no teste: 50% de cimento AH Plus + 50% de cimento Portland; 60% de cimento AH Plus + 40 % de cimento Portland; 70% de cimento AH Plus + 30% de cimento Portland; 80% de cimento AH Plus + 20% de cimento Portland; 90% de cimento AH Plus + 10% de cimento Portland; 100% cimento Portland;100% AH Plus. Os materiais foram proporcionados em massa. Após a espatulação os poços foram preenchidos com os cimentos através de seringas tipo Luer-Look e as placas foram deixadas 2 horas em temperatura ambiente para pré-incubação. Após, foram incubadas em estufa bacteriológica a 36oC, sob condições atmosféricas adequadas por 24 horas. Os halos de inibição foram mensurados com auxílio de um paquímetro digital, sob intensa luminosidade. Com os dados em mãos, os mesmos foram submetidos a análise estatística, empregando-se o teste Kruskal-Wallis para comparação global e o teste de Miller paras as comparações individuais com nível de significância de 5%. Os resultados mostraram que na proporção 50/50, aos 7 dias observou-se material granular birrefringente em meio a tecido de granulação infiltrado por leucócitos mononucleares, com discreta deposição de matriz colágena. Aos 14 dias, discretas fibras colágenas estavam organizadamente depositadas, permeadas por discreto a moderado infiltrado inflamatório mononuclear. Aos 30 dias, observou-se persistência do infiltrado inflamatório mononuclear, com padrão microscópico semelhante ao período de 14 dias. Na proporção 40/60, no período de 7 dias visualizou-se material granular birrefringente circular, em meio a tecido de granulação ricamente celularizado e infiltrado por moderado infiltrado inflamatório mononuclear. Após 14 dias já se notou deposição organizada das fibras colágenas em meio a discreto infiltrado mononuclear. No período de 30 dias, já se observou a presença de tecido conjuntivo fibroso permeado por eventuais leucócitos mononucleares. A proporção 70/30, Aos 7 dias notou-se tecido de granulação ricamente celularizado permeado por moderado infiltrado mononuclear. Após 14 dias, o tecido apresentou-se em organização, com deposição organizada das fibras colágenas. Aos 30 dias, notou-se presença de tecido conjuntivo fibroso e eventuais células gigantes multinucleadas tipo corpo estranho. Na proporção 80/20, após 7 dias observou-se a presença de tecido de granulação ricamente vascularizado. Aos 14 dias a deposição organizada de fibras colágenas foi visualizada, em meio a discreto infiltrado mononuclear e discretas células gigantes multinucleadas tipo corpo estranho. Em 30 dias, células gigantes multinucleadas tipo corpo estranho foram visualizadas em meio a tecido conjuntivo fibroso em organização. Na proporção 90/10, no período de 7 dias, focos de degeneração tecidual foram observados em meio aos grânulos do material e tecido de granulação moderadamente infiltrado por leucócitosmononucleares. Aos 14 dias, houve deposição organizada de fibras colágenas em meio a moderado infiltrado inflamatório mononuclear, com persistência de eventuais áreas de degeneração tecidual próximo ao material. Após 30 dias, organização do tecido conjuntivo fibroso foi observada, permeado por discreto infiltrado mononuclear.Os resultados da atividade antimicrobiana mostraram que as proporções de 80/20, 90/10 e 100% AH Plus apresentaram atividade antimicrobiana, tanto em 24, quanto em 48 horas, com diferença estatisticamente significante com relação aos outros grupos. Conclui-se que a associação do AH Plus ao cimento Portland apresenta boa resposta tecidual e atividade antimicrobiana, em algumas proporções.