DETECÇÃO DA PROTEÍNA NUCLEOLAR FIBRILARINA NA COMPOSIÇÃO MOLECULAR DE CHROMATOID BODIES E CARACTERIZAÇÃO DE SEU PAPEL NA FISIOLOGIA DESTA ORGANELA CITOPLASMÁTICA

Abstract

O chromatoid body (CB) é uma organela citoplasmática que tem sido indicada como possuindo um papel no estoque de RNA e proteínas para a diferenciação final dos espermatozóides. O CB é considerado um complexo macromolecular que parece ter um papel como coordenador do controle póstranscricional de produtos gênicos em células germinativas masculinas haplóides e também como centro de determinação dos destinos de RNAm, estando profundamente relacionado com a fertilidade dos organismos. Alguns estudos indicam que alguns componentes que constituem esse complexo macromolecular citoplasmático possuem origem nucleolar, como por exemplo a proteína fibrilarina (B36), que possui a função no metabolismo de RNAr que ocorre no CFD (componente fibrilar denso) do nucléolo. O presente trabalho acompanhou a expressão da proteína nucleolar fibrilarina em cada estágio do ciclo espermatogênico (I-III; IV-VI; VII-IX; X-XII) dos túbulos seminíferos, e também a distribuição da proteína nucleolar fibrilarina durante a formação de CBs em células germinativas nos túbulos seminíferos nos estágios IV-VI do ciclo espermatogênico, para o teste de duas hipóteses que pretendem esclarecer a real participação da proteína nucleolar fibrilarina no metabolismo de CB. Para isso foram utilizadas técnicas de Western blot e imunofluorêscia. Os resultados demonstraram uma maior expressão de fibrilarina no estágio IVVI do ciclo espermatogênico, e a interação da proteína nucleolar fibrilarina com MIWI (proteína que possui um papel no metabolismo de RNAs no CB) e, também, a interação da proteína nucleolar fibrilarina com HSP70 (proteína que possui papel proteossômico no CB). Desta maneira, nenhuma das duas hipóteses testadas no presente trabalho foi excluída. Para a possibilidade de confirmação de uma das duas hipóteses será realizada co-imunoprecipitação proteica entre fibrilarina e MIWI e entre fibrilarina e HSP70.