ANÁLISE DA DIVERSIDADE DA MICROBIOTA FECAL PELA TÉCNICA DE PCR EM TEMPO REAL DE RECÉM-NASCIDOS COM SEQUÊNCIA DE ROBIN

Abstract

A colonização bacteriana do trato gastrointestinal, a partir do nascimento, envolve vários eventos que podem comprometer a saúde do hospedeiro, principalmente no controle do sistema imunológico. O objetivo do presente estudo foi detectar e quantificar bactérias dos gêneros Lactobacillus spp e Bifidobacterium spp na microbiota fecal de crianças com Sequência de Robin (SR), atendidas em um hospital especializado no primeiro e segundo mês de vida por meio da técnica de PCR em tempo real. O grupo de estudo foi composto por seis crianças com SR, acompanhadas durante o primeiro (M1) e o segundo (M2) mês de vida. O DNA das fezes foi obtido utilizando o kit QIAmp DNA Stool Mini (Quiagem). A reação de qPCR foi realizada em equipamento 7500 Real-Time PCR System (Applied Biosystems), utilizando os sistemas SYBR-Green® e TaqMan® em triplicata. Informação clínica: todas as crianças nasceram de parto cirúrgico; a maioria era do sexo feminino; nível socioeconômico médio; fizeram uso de sonda nasogástrica; receberam dieta hipercalórica; tratamento com antiácido. A média de Lactobacillus spp em quatro crianças no M1 variou entre 8,5x103 e 9,7x108 nº de cópias/g de fezes; no M2, duas apresentaram 8,1x104 e 6,6x105 e duas ausência do microorganismo no M1 e M2. A média de Bifidobacterium spp em seis crianças no M1 variou entre 1,8x107 e 5,5x1011 nº de cópias/g de fezes; no M2 entre 4,2x108 e 3,0x1012 nº de cópias/g de fezes. Assim, o gênero Lactobacillus spp foi encontrado em algumas crianças e em determinados momentos. Houve aumento de Bifidobacterium spp do M1 para M2.