PERFIL E ATIVIDADE DAS METALOPROTEINASES DA MATRIZ EM DENTINA HUMANA E BOVINA

Abstract

As metaloproteinases de matriz são endopeptidases responsáveis pela degradação ou reabsorção de todos os compostos (componentes) da matriz extracelular. Elas estão envolvidas no desenvolvimento do esmalte dentário humano e remodelamento da matriz orgânica da dentina. As MMPs -2,-8,-9 já foram identificadas em dentes humanos. Desde que, a dentina bovina é frequentemente utilizada em estudos in vitro e in situ como substituta para dentina humana, o objetivo deste estudo foi avaliar a expressão e atividade das MMPs-2 e MMPs-9 presentes em dentina humana e bovina. Blocos de incisivos bovinos e molares humanos foram obtidos de raízes e coroas. Foram, então, triturados utilizando-se um moinho criogênico. O pó de dentina foi desmineralizado em ácido cítrico a 0,87M pH 2,3 por 24 h a 4° sob agitação. Após a centrifugação, o pó desmineralizado de dentina foi suspendido em um tampão de extração e sonificado três vezes. As amostras foram incubadas por 24 h no tampão de extração. Após a centrifugação, o sobrenadante foi coletado e o total de concentração de proteínas foi medido pelo método de Lowry. O gel de zimografia foi realizado. O total de MMPs 2 e 9 ativas foi determinado através do teste ELISA. Atividades gelatinolíticas das MMP-2 e MMP-9 foram detectadas nos extratos de dentina da coroa e da raiz tanto de origem humana quanto bovina. O total de MMP-2 ativa foi 14,85 ng/ml para raiz bovina, 20,16 ng/ml para raiz humana, 14,71 ng/ml para coroa bovina e 22,92ng/ml coroa humana. Os valores correspondentes para MMP-9 foram 16.71ng/ml para raiz bovina, 19,95 ng/ml para raiz humana, 21,97 ng/ml para coroa bovina e 19,46 ng/ml para coroa humana. Os resultados indicam que os tipos de substratos de dentina testados podem ser utilizados em estudos envolvendo o desempenho das MMPs 2 e 9.